Identificazione e banking di ceppi
Un ceppo di produzione è un asset solo se sai esattamente che cos’è e se puoi ripartire dalla stessa cellula fra dieci anni. Identificazione molecolare e cell banking sono il lavoro che trasforma una coltura in una linea di produzione documentata e ripetibile.
Parliamo del tuo ceppoTre situazioni che portano qui
L’identificazione e il banking arrivano quasi sempre da una di queste tre esigenze, e quale sia decide il livello di risoluzione che serve.
Non sai con certezza che ceppo hai
Una coltura ereditata, un isolato di collezione, un ceppo arrivato con un’acquisizione. Identificazione molecolare e sequenziamento dicono che cos’è davvero, al livello di risoluzione che ti serve.
Ogni produzione parte da una cellula diversa
Senza una banca cellulare la variabilità tra lotti è strutturale. Master e Working Cell Bank fissano il punto di partenza e lo rendono lo stesso ogni volta.
Devi dimostrare identità e purezza
A un cliente, a un partner o a un’autorità. Sequenziamento, confronto comparativo e controllo dei contaminanti, con i dati nella forma che il fascicolo richiede.
Come si svolge un progetto
Tre fasi, ciascuna che si chiude con una decisione e non con un report. Quanto dura ciascuna dipende dall’organismo e da che cosa devi poter dimostrare: la dimensioniamo dopo il primo confronto, non prima.
Identificazione e caratterizzazione
Identificazione molecolare del ceppo, sequenziamento, anche fino al genoma completo dove serve, confronto con i riferimenti pertinenti. Il risultato è che cos’è, con quale grado di certezza e che cosa lo distingue.
Costruzione delle banche
Master Cell Bank e Working Cell Bank, crioconservazione a −80 °C, e su ogni banca prodotta i controlli di identità, vitalità e assenza di contaminanti.
Qualifica e monitoraggio
Stabilità della banca nel tempo, confronto dei lotti successivi contro il riferimento, e i metodi molecolari — qPCR e PMA-qPCR — che permettono di distinguere cellule vitali da DNA residuo.
Che cosa misuriamo
Un ceppo è documentato quanto i controlli che gli stanno dietro. Questi sono gli endpoint che riportiamo.
- Identità del ceppo — con il metodo e il livello di risoluzione dichiarati
- Sequenza — dal marcatore al genoma completo, secondo ciò che il progetto deve dimostrare
- Vitalità — conta vitale su ogni banca, misurata e non stimata
- Purezza e contaminanti — verificata su terreni differenziali e in qPCR
- Distinzione vitale / non vitale — PMA-qPCR dove contare il DNA non basta
- Stabilità della banca — identità e prestazione mantenute nel tempo di conservazione
- Confronto tra lotti — ogni banca nuova confrontata con il riferimento
- Tracciabilità — origine, passaggi e condizioni documentati per ogni banca
Il laboratorio dietro tutto questo
Dotazione
| Biologia molecolare | Estrazione, PCR, qPCR e PMA-qPCR, sequenziamento, anche fino al genoma completo |
| Conservazione | Crioconservazione e storage a −80 °C, con controlli su ogni banca prodotta |
| Microbiologia | Conte vitali, terreni differenziali e selettivi, controllo dei contaminanti |
Che cosa porti a casa
| Banche | MCB e WCB, con i controlli eseguiti su ciascuna |
| Dossier | Identità, sequenze, controlli e condizioni, nella forma che serve al tuo fascicolo tecnico |
| Aliquote | Fornitura nei tempi e nelle quantità che la produzione richiede |
Partiamo dal ceppo
Raccontaci da dove viene il ceppo e che cosa devi poter dimostrare. Ti diremo quale livello di identificazione serve e come sarebbe la prima fase.
Parliamo del tuo ceppo